뽕나무 추출물의 유전독성 및 돌연변이원성

초록

강원도 산지의 뽕나무의 잎, 줄기, 뿌리를 건조하여 100% EtOH와 물로 추출하여 얻은 추출물 및 EtOH 추출물로부터 용매별 분획물들을 NIH/3T3에 대한 세포독성, comet assay를 이용한 DNA damage 손상으로부터 유전 독성, in vitro micronucleus assay를 이용한 유전독성, Ames test를 이용한 돌연변이 유발을 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1) 각 시료들의 NIH/3T3에 대한 세포독성은 0.5㎎/㎖ 농도에서 약 80%의 생육활성을 나타냈다. 2) 뽕나무 잎의 1차 추출물 들은 comet assay에서 양성 대조구 대비 약 40% 정도의 유전독성을 보였다. 뽕잎의 EtOH 추출물에서 분획한 분획물 시료중 수용성 분획은 거의 독성이 나타나지 않았으나, hexan의 0.25㎎/㎖ 농도의 분획물이 약 50% 정도를 보였으며 다른 시료들은 이 보다 약한 독성을 보였다. 또한 뽕나무 줄기의 분획물 시료들 중에서 0.5㎎/㎖ 농 도의 chloroform 분획물이 양성 대조구 대비 가장 강한 50 %의 유전독성을 보인것 외에 다른 시료들은 그 보다 약한 독성을 보였다. 3) In vitro micronucleus assay 를 이용한 유전독성은 재료의 1 차 추출물은 거의 유전독성이 나타나지 않았고 EtOH추출물의 재분획물인 시료중에서 0.5㎎/㎖의 농도의 hexan 및 chloroform 분획물은 MN의 발생 빈도가 음성대조구에 비하여 약 2배의 증가로 나타났다. 또 뽕나무 줄기의 분획물 시료들에서 0.5㎎/㎖의 hexan, chloroform 및 EtOAc 분획물에 서 MN이 관찰 되었으나 그중 chloroform 분획물 시료에서 더 많은 MN 발생을 보였다. 4) Ames test를 이용한 돌연변이 실험결과 뽕나무 잎 1차추출물들은 0.25㎎/㎖의 농도에서 TA98에 대하여 거의 돌연변이 현상이 없었고, EtOH 추출물로부터 재 분획한 BuOH 및 chloroform 분획물에서는 강한 돌연변이 현상이, 또 5㎎/㎖ 의 hexan 분획물에서는 더욱 강한 돌연변이 현상이 관찰되었다. TA100 strain에 대하여는 각 재료의 1차 추출물이나 분획들의 낮은 농도 (1.25㎎/㎖)에서는 돌연변이 현상이 매우 약하거나 거의 없었고, 0.25㎎/㎖의 1차 추출물들에서는 매우 약한 돌연변이가 나타났으나 이들의 EtOAc 분획물은 다소 강한 돌연변이 유발성이 관찰 되었다. 그러나 수용성 분획물은 두 균주에 대하여 전혀 돌연변이 유발성을 보이지 않았다. 5) 뽕나무 줄기로부터 조제한 시료중 수용성 분획물과 EtOAc 분획물은 TA98에서 전혀 돌연변이 유발성이 없었으나 0.25㎎/㎖의 농도의 물 추출물, EtOH 추출물, hexan 및 chloroform 분획물들이 약 40% 증가한 복귀변이 콜로니가 관 찰되었고, 이보다 농도를 증가시킨 물 추출물 및 BuOH 분획물에서도 같은 수준의 복귀변이 콜로니가 관찰 된 결과로부터 돌연변이 유발성이 있음이 확인되었다. TA100에 대하여 뽕나무 줄기의 수용성 분획물은 전혀 돌연변이가 나타나지 않았고, 0.25㎎/㎖의 물 추출물, EtOH 추출물, hexan 및 BuOH 분획물들이 약 10% 증가한 약한 돌연변이가 관찰되었다. 그러나 농도를 5㎎/㎖로 한 EtOAc 분획물은 26%의 돌연변이 유발성을 보였다. 이상의 결과로 부터 뽕나무를 이용한 식용 제품생산을 고려할 때 추출물들의 제조와 선택을 가름하는 자료로서의 활용이 기대되며 앞으로 in vivo test 등 더욱 연구할 필요가 있을 것으로 사료된다

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