KIOM-79에 의한 p65 단백질의 핵내 이동 및 iNOS 발현 억제

초록

후박 (Magnolia officinalis), 갈근 (Pueraria lobata), 감초 (Glycyrrhiza uralensis) 및 대극(Euphorbia pekinensis)은 염증성질병을 포함한 다양한 질병을 치료하기 위해 사용되었다. 본 실험에서는 각각의 천연물의 복합추출물인 KIOM-79가 큰포식세포에서 inducible NO synthase (iNOS) 유전자의 발현을 억제시키는 기전을 밝 혀내기 위하여 면역형광염색, RT-PCR, electrophoretic mobility shift assay (EMSA) 등을 실시하였다. 면역형광염 색 소견을 보면 RAW 264.7 세포에 lipopolysaccharide (LPS)에 의해 유도된 iNOS 단백질의 발현이 KIOM-79에 의해 억제되는 것을 알 수 있다. Western blot과 RT-PCR 분석에 의하면 KIOM-79가 LPS에 의한 iNOS의 발현 을 억제함을 확인 할 수 있다. LPS와 KIOM-79를 처리한 RAW 264.7 세포에서 nuclear extract를 추출하여 EMSA로 분석한 결과, LPS에 의해 유도된 NF-κB/Rel의 DNA 결합이 KIOM-79에 의해 억제됨을 확인하였다. 면역형광염색 소견을 보면 NF-κB/Rel의 구성단백질 중의 하나인 p65단백질은 세포질에서 발현되고 있으며, LPS를 처리하면 p65가 핵으로 이동함을 알 수 있다. 이때 KIOM-79를 처리하면 LPS에 의한 p65의 핵 내 이동 이 억제됨을 확인할 수 있다. 결론적으로, KIOM-79는 큰포식세포에 작용해 iNOS 유전자의 발현을 억제하며, 이 러한 큰포식세포의 활성억제는 p65 단백질의 핵 내 이동 억제를 통해서 유도되는 것으로 사료된다.

키워드